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土壤外切-β-1，4-葡聚糖酶（S-C1）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0344 | 售價(jià)（元） | 1500 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0344 |
土壤外切-β-1，4-葡聚糖酶（S-C1）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S） |
100管/48樣 |
測(cè)定意義：
C1（EC3.2.1.91）存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi)，是纖維素酶系的組份之一，C1催化多聚糖鏈的末端非還原端釋放出纖維二糖和葡萄糖。
測(cè)定原理：
采用3,5－二硝基水楊酸法測(cè)定S-C1催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
試劑的組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0344-100T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
6ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
25ml |
4℃ |
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說(shuō)明書(shū) |
一份 |
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自備儀器和用品：
酶標(biāo)儀/可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備：
稱取約0.1g新鮮土樣或風(fēng)干土樣，加入1ml提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，室溫振蕩提取30min，然后10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）
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試劑名稱（μl） |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
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樣本 |
10 |
10 |
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試劑一 |
100 |
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蒸餾水 |
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100 |
混勻，37℃準(zhǔn)確水浴2h
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試劑二 |
200 |
200 |
混勻， 90℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻后，取200μl至微量石英比色皿或96孔板中，測(cè)540nm下吸光值A，計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-C1活性計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y為吸光值。
單位的定義：每g土樣每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。
S-C1活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000：1mg/ml=1000ug/ml；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.11ml； V樣：加入樣本體積，0.01 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，120 min； W：樣本質(zhì)量，g；
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 3.2039x - 0.0673；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y為吸光值。
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。
S-C1活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W
1000：1mg/ml=1000ug/ml；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.11ml； V樣：加入樣本體積，0.01 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，120 min； W：樣本質(zhì)量，g。