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土壤脂肪酶(S-LPS)檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號 SH0345 售價(元) 540
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0345

土壤脂肪酶(S-LPS)檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。

測定原理:

LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測定脂肪酸生成速率,即可計算LPS活性。

試劑組成和配制:

產品名稱

SH0345-50T/48S

Storage

試劑一:液體

90ml

4℃

試劑二:粉劑

14ml

4℃

試劑三:甲苯

100ml(自備)

4℃

試劑:粉劑

20ml

4℃

標準品:液體

10μl

4℃

說明書

一份

試劑二:液體14ml×1瓶,4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩20min;

標準品:液體10μl×1瓶,10 μmol/ml的標準溶液,4℃保存。臨用前加入3.168 ml甲苯,充分溶解。

自備儀器和用品:

研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1ml玻璃比色皿、可調式移液槍、甲苯100ml、冰和蒸餾水。

樣本處理:

建議稱取約0.1g土樣,加入1ml試劑一進行冰浴勻漿,再用回旋式振蕩器振蕩提取15min,4℃,4000g離心10min,取上清待測。

S-LPS測定操作:

1、分光光度計預熱30 min以上,調節(jié)波長到710 nm,蒸餾水調零。

2、試劑一和試劑二置于37℃水浴預熱30min以上。

3、在5ml EP管中依次加入下列試劑

試劑名稱(μl

空白管

測定管

蒸餾水

375

 

樣本

 

125

試劑一

750

750

試劑二

 

250

37℃振蕩反應10 min

試劑三

2000

2000

37℃振蕩反應10 min后,8000g,25℃,離心10min,取上清液

試劑名稱(μl

空白管

測定管

標準管

上清液

1200

1200

 

標準品

 

 

1200

試劑四

300

300

300

37℃振蕩反應5 min后,靜置5min,取800μl上層液加入1 ml玻璃比色皿,于710nm處測定吸光值。

注意事項:

空白管和標準管只需測定一次。

S-LPS活性計算公式

活性單位定義:37℃中每克土樣每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。

S-LPS (μmol/min/g 土樣) = [C標準品×(A測定管-A空白管A標準管- A空白管)]×V反總÷W×V÷V樣總)÷T

=16×[(A測定管-A空白管A標準管- A空白管)]÷W

C標準品:10 μmol/ml;V反總:反應總體積,2ml;V樣:反應中加入樣本體積,0.125mlV樣總:加入提取液體積,1mlW:樣本質量,g;T:催化反應時間,10 min。

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