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土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號(hào) SH0343 售價(jià)(元) 840
規(guī)格 50T/24S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

SH0343

土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

C1EC3.2.1.91)存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,C1催化多聚糖鏈的末端非還原端釋放出纖維二糖和葡萄糖。

測(cè)定原理:

采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定C1催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱(chēng)

SH0343-50T/24S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

試劑一:液體

15ml

4℃

試劑二:液體

60ml

4℃

說(shuō)明書(shū)

一份

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:

稱(chēng)取約0.1g新鮮土樣或風(fēng)干土樣,加入1ml提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,室溫振蕩提取30min,然后10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟:

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑)

試劑名稱(chēng)(μl

測(cè)定管

對(duì)照管

  樣本

50

50

試劑一

500

 

蒸餾水

 

500

混勻,37℃準(zhǔn)確水浴2h

試劑二

1000

1000

混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,測(cè)540nm下吸光值A,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

S-C1活性計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每g土樣每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。

S-C1活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V÷V樣總) ÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

10001mg/ml=1000ug/ml;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.55ml; V樣:加入樣本體積,0.05 mlV樣總:加入提取液體積,1 mlT:反應(yīng)時(shí)間,120 min;W:樣本質(zhì)量,g。

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