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土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）檢測試劑盒（微量法 100T/48S）
| 貨號 | SH0342 | 售價（元） | 1800 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0342 |
土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）檢測試劑盒（微量法 100T/48S） |
100管/48樣 |
測定意義：
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測定原理：
S-LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
試劑的組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0342-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
35ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
-20℃ |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
酶標(biāo)儀/可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿和蒸餾水。
S-LAP測定步驟：
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至405nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在試劑二瓶中加入15ml試劑一充分溶解（如較難溶解，可60℃水浴加熱約30min促進(jìn)溶解）；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
3、操作表：
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試劑名稱 |
對照管 |
測定管 |
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新鮮土樣（g） |
0.05 |
0.05 |
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試劑一（μl） |
300 |
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試劑二（μl） |
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300 |
混勻， 37℃振蕩反應(yīng)1h后，8000g 4℃離心10min，取200μl上清液于微量石英比色皿或96孔板中，405nm處測定吸光值A，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設(shè)一個對照管。
S-LAP活力單位的計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
單位的定義：每天每g土樣每天生成1 μmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
S-LAP（μmol/d /g 土樣）＝ΔA×V反總÷（ε×d）×106÷W÷T=14.8×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，3×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；T：反應(yīng)時間，1h=1/24d； W：樣本質(zhì)量，0.05g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
單位的定義：每天每g土樣每天生成1 μmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
S-LAP（μmol/d /g 土樣）＝ΔA×V反總÷（ε×d）×106÷W÷T=29.6×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，3×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，0.5cm；T：反應(yīng)時間，1h=1/24d； W：樣本質(zhì)量，0.05g。