維生素E（VE）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)
| 貨號 | SH0599 | 售價（元） | 456 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0599 |
維生素E（VE）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義：
維生素E（Vitamin E）是一種脂溶性維生素，其水解產物為生育酚，是生物體中最主要的抗氧化劑之一，能阻止不飽和脂肪酸收到過氧化作用的損傷，維持不飽和脂肪酸細胞膜的完整性和正常功能，具有延緩衰老、預防溶血性貧血作用，在醫(yī)藥、化妝品、保健品、食品行業(yè)具有較高的應用價值。
測定原理：
VE還原Fe3+為Fe2+，Fe2+與1,10-菲羅啉產生有色絡合物，在530nm有特征吸收峰。
組成：
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產品名稱 |
SH0599-50T/24S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
5ml |
4℃避光 |
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試劑二：液體 |
5ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
5ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
15ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑三：粉劑×1 瓶，-20 ℃保存，用時加入 4ml 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；
試劑四：粉劑×1 瓶，4 ℃保存，用時加入 4ml 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；
自備儀器和用品：
天平、研缽、離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿、漩渦震蕩儀。
樣本處理：
1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.2g，加入1ml提取液）加入提取液，充分勻漿后用提取液定至2ml，在漩渦混勻儀上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測定。
2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議1000萬細胞加入2ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；在漩渦混勻儀上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測定。
3. 血清：取0.1ml，加1.9ml提取液，漩渦儀混勻上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測定。
測定操作：
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對照管 |
測定管 |
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樣品（μl） |
500 |
500 |
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試劑一（μl） |
100 |
100 |
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試劑二（μl） |
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100 |
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試劑三（μl） |
100 |
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充分混勻，25℃反應5min |
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試劑四（μl） |
300 |
300 |
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充分混勻，于1ml玻璃比色皿，無水乙醇調零，測定530nm處吸光值，記為A對照管和A測定管，△A=A測定管-A對照管。 |
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計算公式：
標準曲線：y = 0.22x + 0.0065， R2 = 0.9978
1. 按照蛋白含量計算
VE含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷（V樣×Cpr）
= 9.09×（△A -0.0065）÷ Cpr
2. 按照樣本質量計算
VE含量（μg/g）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷（V樣×W÷V樣總）
= 18.18×（△A -0.0065）÷ W
3. 按照細胞數(shù)量計算
VE含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷（V樣×細胞數(shù)量÷V樣總）
= 18.18×（△A -0.0065）÷ 細胞數(shù)量
4. 按照液體體積計算
VE含量（μg/ml）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷V樣×20
= 181.82×（△A -0.0065）
V反總：反應總體積，1ml；：V樣：加入樣本體積，0.5ml；V樣總：加入提取液體積，2ml； Cpr：蛋白濃度，mg/ml；W：樣本質量，g
注意事項：
1. 若反應體系產生沉淀，需要將樣品進行適當?shù)南♂?，并在計算公式中乘以稀釋倍?shù)。
2. 最低檢出限為1μg/g。