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土壤亞硝酸還原酶（S-NiR）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)
| 貨號 | SH0381 | 售價(jià)（元） | 636 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0381 |
土壤亞硝酸還原酶（S-NiR）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義：
土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一，參與亞硝酸鹽至NO的還原反應(yīng)，它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率，為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。
測定原理：
亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。
試劑的組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0381-50T/24S |
Storage |
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試劑一：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
25ml |
4℃避光 |
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試劑五：液體 |
25ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加10ml蒸餾水溶解。
試劑三：液體10ml×1瓶，4℃保存。（如出現(xiàn)沉淀可以70-80℃加熱溶解；
試劑四：液體25ml×1瓶，4℃避光保存。（如出現(xiàn)沉淀可以70-80℃加熱溶解；
工作液：臨用前根據(jù)用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。
自備儀器和用品：
天平、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1ml玻璃比色皿。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
測定操作表：
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空白管 |
對照管 |
測定管 |
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風(fēng)干土樣（g） |
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0.1 |
0.1 |
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蒸餾水（μl） |
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200 |
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試劑一（μl） |
200 |
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200 |
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試劑二（μl） |
200 |
200 |
200 |
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混勻后，25℃反應(yīng)1h |
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試劑三（μl） |
200 |
200 |
200 |
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充分震蕩30S，10000rpm，4℃，離心10min |
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上清液（μl） |
500 |
500 |
500 |
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工作液（μl） |
1000 |
1000 |
1000 |
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充分混勻，用蒸餾水調(diào)零，靜置3min后測定540nm處各管吸光值，分別記為A空白管、A對照管、A測定管。 |
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計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 1.5562x+ 0.0088，R2 = 0.996；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/ml），y為吸光值（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）。
酶活單位定義：每g土樣每天還原1μmol NO2ˉ 的量為一個(gè)酶活力單位。
S-NiR（μmol /d /g土樣）=[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088] ×V標(biāo)÷1.5562÷W÷T
= 3.084×[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷W
T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d；V標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)液體積，0.2ml； W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項(xiàng)：
1. 配制好的工作液3天內(nèi)使用完。
2. 若吸光值超過3，將上清液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尯笤偌尤牍ぷ饕猴@色，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
3. 嚴(yán)格控制顯色時(shí)間，否則會對結(jié)果有影響。
4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為0.03μmol/ml-1.5μmol/ml。
5. A空白管-（A測定管-A對照管）線性范圍為0.02-3。