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CA-SiR Ligand
| 貨號(hào) | CA-SiR | 售價(jià)（元） | 1320 |
| 規(guī)格 | 5 nmol | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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產(chǎn)品 |
貨號(hào) |
包裝（干粉） |
價(jià)格 |
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CA-SiR Ligand |
CA-SiR-1 |
50 nmol |
7500 |
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CA-SiR-2 |
5 nmol |
1320 |
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CA-TMR Ligand |
CA-TMR-1 |
150 nmol |
4500 |
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CA-TMR-2 |
15 nmol |
1320 |
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CA-R110 Ligand |
CA-R110-1 |
50 nmol |
7500 |
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CA-R110-2 |
5 nmol |
1320 |
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CA assorted Ligands |
CA-1 |
CA-SiR-2 *1 |
3200 |
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CA-TMR-2 *1 |
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CA-R110-2*1 |
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產(chǎn)品 |
貨號(hào) |
包裝（干粉） |
λEx /λEm (nm) |
適用范圍 |
儲(chǔ)存條件 |
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CA-SiR Ligand |
CA-SiR-1 |
50 nmol |
651/668 |
Confocal、SIM、STED |
-20℃避光 |
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CA-SiR-2 |
5 nmol |
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CA-TMR Ligand |
CA-TMR-1 |
150 nmol |
555/578 |
Confocal、SIM |
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CA-TMR-2 |
15 nmol |
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CA-R110 Ligand |
CA-R110-1 |
50 nmol |
505/527 |
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CA-R110-2 |
5 nmol |
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CA assorted Ligands |
CA-1 |
CA-SiR-2 *1 |
-- |
Confocal、SIM、STED |
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CA-TMR-2 *1 |
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CA-R110-2*1 |
2. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
HaloTag 技術(shù)基于融合蛋白標(biāo)簽和合成熒光配基之間共價(jià)鍵的形成，可用于標(biāo)記細(xì)胞或其 他生化環(huán)境中的目的蛋白以表征和分析其定位及功能。HaloTag 報(bào)告基因蛋白是 33kDa 的單體 蛋白，是一種經(jīng)基因工程改造、無催化活性的水解酶衍生物，在生理?xiàng)l件下可以快速和 HaloTag 熒光配體形成不可逆的共價(jià)鍵從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的蛋白的高特異性標(biāo)記[1]。此技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于 哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物、細(xì)菌、酵母和活體模式動(dòng)物等生物體系。
CA-SiR Ligand 則是一款以四甲基硅羅丹明為母體的遠(yuǎn)紅發(fā)射熒光配體，基于其在溶液中 無色親酯的內(nèi)酯結(jié)構(gòu)和標(biāo)記在 HaloTag 蛋白后熒光的兩性離子結(jié)構(gòu)之間的高效轉(zhuǎn)換，可以實(shí)現(xiàn) 對(duì)目標(biāo)蛋白的“免洗”標(biāo)記。
CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 是以氧羅丹明為母體的熒光配體，二者皆具有良好 的熒光亮度、較高的光穩(wěn)定性、較低的光毒性和較好的細(xì)胞膜滲透能力；目前已廣泛應(yīng)用于寬 場(chǎng)、共聚焦、單分子定位示蹤和 SIM 超分辨成像等多種模態(tài)的成像系統(tǒng)中，其較好的生物相 容性使其可以應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物、細(xì)菌、酵母等生物體系的熒光成像。
相較于 CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 熒光配體，CA-SiR Ligand 熒光配體不僅具有 良好的熒光亮度、較高的光穩(wěn)定性和較低的光毒性，其極佳的生物相容性和高效的細(xì)胞膜滲透能力，使得 CA-SiR Ligand 熒光配體在哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物、細(xì)菌、酵母和活體模式動(dòng)物等生 物體系中有著廣泛的應(yīng)用，并可在除寬場(chǎng)、共聚焦、單分子定位示蹤和 SIM 之外的 STED 超 分辨成像體系中進(jìn)行活細(xì)胞熒光成像。
3.實(shí)驗(yàn)步驟
3.1 在 CA-SiR Ligand 中加入 50 μL/5 μL 新鮮干燥的 DMSO，混合均勻，得到 1 mM 母液。
3.2 將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37 ℃，將 CA-SiR Ligand 母液按照 1000- 5000 倍稀釋比例加入到預(yù)熱的 培養(yǎng)基中，稀釋后的染液建議盡快使用，久置后可能導(dǎo)致部分染料分解或沉淀。
3.3 吸去已經(jīng)表達(dá) Halo-tag 蛋白細(xì)胞的培養(yǎng)基，更換為稀釋好的培養(yǎng)基染液，在培養(yǎng)箱中孵育
5-15 分鐘后即可在不更換培養(yǎng)基的情況下進(jìn)行“免洗”熒光成像。也可以對(duì)用預(yù)熱的培養(yǎng)基 清洗細(xì)胞一至兩次后用于熒光成像。
注：1、我們建議對(duì)大多數(shù)細(xì)胞系使用 200-250 nM，如 HeLa、COS7、U-2OS 等；對(duì)組織或活 體動(dòng)物染色使用 500-1000 nM。
2、不同樣品染色條件有所差異，建議起始染色方法為 1000 倍稀釋，15 分鐘染色，請(qǐng)根 據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行調(diào)整。
3、CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 細(xì)胞滲透性熒光配基的實(shí)驗(yàn)步驟類同上述實(shí)驗(yàn)操 作。
4.參考文獻(xiàn)
1. Los, G. et al. "HaloTag: A novel protein labeling technology for cell imaging and protein analysis." ACS Chem. Biol., 2008, 3, 6, 373-382.