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游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒-測(cè)植物組織(微量法 100T/48S)

貨號(hào) SH0452 售價(jià)(元) 660
規(guī)格 100T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0452

游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒-測(cè)植物組織(微量法 100T/48S)

100T/48S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),也可反映食物貯藏中的品質(zhì)變化。

測(cè)定原理:

在弱酸性條件下,FFA與銅鹽反應(yīng)生成銅皂,在715nm處有特征吸收峰,在一定范圍內(nèi)游離脂肪酸含量與顯色程度呈線性關(guān)系。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0452-100T/48S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

試劑二:液體

20ml

4℃

試劑三:液體

20ml

4℃

說(shuō)明書(shū)

一份

自備儀器和用品:

研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩儀、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。

樣品中FFA提取:

組織用蒸餾水沖洗干凈后,用吸水紙吸取表面水分,搗碎后按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml試劑一)加入試劑一,震蕩提取3h,8000g4℃離心10min,取上清液待測(cè)。

測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到715 nm。

2. 對(duì)照管:取上清液0.4ml,加0.2ml試劑二,充分震蕩5min,室溫靜置5min,取上層200μl于微量石英比色皿/96孔板,調(diào)零。

3. 測(cè)定管:取上清液0.4ml,加0.2ml試劑三,充分震蕩5min,室溫靜置5min,取上層200μl于微量石英比色皿/96孔板,測(cè)定吸光值,記為A。

FFA含量計(jì)算:

a. 使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0075 x+ 0.0055,R2=0.994

1按樣本蛋白濃度計(jì)算

FFAnmol/mg prot= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr

2按樣本質(zhì)量計(jì)算

FFAnmol/g 鮮重)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W

V1:加入樣本體積,0.4ml;V2:提取液體積,1ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣品質(zhì)量,g。

b.使用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0038 x+ 0.0055,R2=0.994

1按樣本蛋白濃度計(jì)算

FFAnmol/mg prot= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr

2按樣本質(zhì)量計(jì)算

FFAnmol/g 鮮重)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W

V1:加入樣本體積,0.4ml;V2:提取液體積,1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣品質(zhì)量,g。

注意事項(xiàng):

1. 蛋白含量不可直接用提取的上清液直接測(cè)定,可用蒸餾水或緩沖液或生理鹽水選用本公司的BCA法蛋白含量測(cè)定試劑盒。

2. 最低檢出限為2 nmol/ml。

 

 

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