當(dāng)前位置： 首頁(yè) - 產(chǎn)品目錄 - 生化試劑盒
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（Lip）檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S)
| 貨號(hào) | SH0437 | 售價(jià)（元） | 636 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
|
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
|
SH0437 |
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（Lip）檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S) |
50管/48樣 |
測(cè)定意義：
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。
測(cè)定原理：
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶催化天青脫甲基，在651nm處測(cè)定吸光值減少。
試劑組成和配制：
|
產(chǎn)品名稱 |
SH0437-50T/48S |
Storage |
|
試劑一：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
|
試劑二：液體 |
12ml |
4℃避光 |
|
試劑三：液體 |
12ml |
4℃ |
|
說(shuō)明書 |
一份 |
|
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入80ml蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存1個(gè)月；
需自備儀器和用品：
天平、研缽、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿、可調(diào)式移液器、冰。
酶液提?。?/span>
1、組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
2、細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3、培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至651nm，蒸餾水調(diào)零。
2、臨用前按每個(gè)樣本試劑一：試劑二：試劑三= 400:200:200（μl）的比例配制工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。
3、在1ml玻璃比色皿中依次加入如下試劑
|
|
測(cè)定管 |
|
樣品（μl） |
200 |
|
工作液（μl） |
800 |
充分混勻，立即測(cè)定651nm處10s和130s吸光值，記為A1和A2，△A=A1- A2
酶活計(jì)算公式：
1．按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義：每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。
LiP活性（U/mg prot）= ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.02÷T =125×ΔA÷Cpr
2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義：每g組織在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。
LiP活性（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.02÷T =125×ΔA÷W
3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活性定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。
LiP活性（U/104 cell）＝ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.02÷T =0.25×ΔA
4．按照液體體積計(jì)算
酶活性定義：每ml血清（漿）在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.02為一個(gè)酶活力單位。
LiP活性（U/ml）=ΔA×V反總÷V樣÷0.02÷T =125×ΔA
V反總：反應(yīng)總體積，1ml；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.2ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，2min