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高鐵還原酶(FCR)檢測試劑盒(分光光度法 50T/48S)

貨號 SH0419 售價(元) 1020
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0419

高鐵還原酶(FCR)檢測試劑盒(分光光度法 50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

高鐵還原酶(ferric-chelate reductase,FCR)催化高價鐵螯合物中的Fe3+還原為Fe2+,在部分物種鐵元素的吸收中有重要作用。

測定原理:

FCR催化Fe3+還原為Fe2+,Fe2+ferrozine反應(yīng)顯色,在562nm下有特征吸光值。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0419-50T/48S

Storage

試劑一:液體

15ml

4℃避光

試劑二:液體

15ml

4℃避光

試劑三:液體

15ml

4℃

說明書

一份

需自備儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提?。?/span>

按照組織質(zhì)量(g):水ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml蒸餾水),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至562nm,蒸餾水調(diào)零。

2、工作液配制:將試劑一、二、三以1:1:1的比例混合。臨用前配制,用多少配多少

3、在1ml玻璃比色皿中,加入250μl樣本上清和750μl工作液,混勻,記錄初始吸光值A130min后的吸光值A2。ΔA=A2-A1。

FCR活性計算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 8.0014x + 0.0011,R2 = 0.9997

按樣本質(zhì)量計算

單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmolFe2+-ferrozine定義為一個酶活力單位。

FCRnmol/min/g 鮮重)=△A-0.0011÷ 8.0014×1000×V標(biāo)÷(V÷V樣總×W)÷T = 4.166×△A-0.0011÷W

按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmolFe2+-ferrozine定義為一個酶活力單位。

FCRnmol/min/mg prot=△A-0.0011÷8.0014×1000×V標(biāo)÷(V÷V樣總×Cpr)÷T =4.166×△A-0.0011÷Cpr

V樣總:加入提取液體積,1 mlV樣:反應(yīng)中樣品體積,250μl;V標(biāo):加入標(biāo)準(zhǔn)品體積 ,250μl;T:反應(yīng)時間,30minW:樣品質(zhì)量,gCpr:樣本蛋白濃度,mg/ml;1000,μmolnmol的轉(zhuǎn)換系數(shù)。

 

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