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土壤漆酶(SL)檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號(hào) SH0367 售價(jià)(元) 816
規(guī)格 50T/24S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0367

土壤漆酶(SL)檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用

測(cè)定原理:

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0367-50T/24S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

工作液:粉劑

2

4℃避光

說明書

一份

工作液:粉劑×2瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加25ml試劑一溶解。

自備儀器和用品:

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿、震蕩儀

樣品處理:

新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩。

測(cè)定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到420nm,蒸餾水調(diào)零。

 

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本(g

0.1

0.1

試劑一(μl

1000

 

工作液(μl

 

1000

37℃震蕩反應(yīng)10min,冰浴5min,10000g,4℃離心10min,取出800μl反應(yīng)液立即于420nm處測(cè)定吸光值,分別記為A1A2。△A=A2-A1。

酶活性計(jì)算公式

酶活性定義:每克土壤每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。

SL活性(nmol/min/g 土樣)= ×V反總÷W÷T= 2.78×△A÷W

εABTS毫摩爾消光系數(shù):36L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,1ml; W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,10min

注意事項(xiàng):

1、工作液需臨用前配制,并且盡快使用,4℃保存一周,若變色則不能使用。

2、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

3、反應(yīng)完立即記錄數(shù)據(jù),以免造成逆向反應(yīng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

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