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FDA水解酶（FDA）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0352 | 售價(jià)（元） | 1440 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0352 |
FDA水解酶（FDA）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/48S） |
100T/48S |
測(cè)定意義：
FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化，是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。
測(cè)定原理：
FDA是一種無(wú)色化合物，在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解，并經(jīng)脫水反應(yīng)，產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在490nm處有強(qiáng)吸收峰，通過(guò)檢測(cè)490nm處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0352-100T/48S |
Storage |
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標(biāo)準(zhǔn)液：液體 |
4ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
40ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
-20℃避光 |
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試劑三：液體 |
40ml |
4℃ |
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說(shuō)明書(shū) |
一份 |
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試劑二：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加4ml試劑三溶解。
自備儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋
樣本處理：
稱取風(fēng)干過(guò)30-50目篩土壤約0.1g，備用。
測(cè)定操作表：
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空白管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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樣本（g） |
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0.05 |
0.05 |
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標(biāo)準(zhǔn)液（μl） |
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40 |
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雙蒸水（μl） |
40 |
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試劑一（μl） |
200 |
200 |
240 |
200 |
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試劑二（μl） |
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40 |
充分混勻，30℃，震蕩1h
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試劑三（μl） |
160 |
160 |
160 |
160 |
10000g，25℃，離心5min，取200μl上清于微量石英比色皿/96孔板中測(cè)定490nm處吸光值A，△A1=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管，△A2=A測(cè)定管-A對(duì)照管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
酶活性計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。
FDA活性（μmol/d/g）=（△A2÷△A1×C標(biāo)準(zhǔn)品）×V反總÷W
= 0.96×（△A2÷△A1）÷W
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。
FDA活性（μmol/d/g）=（△A2÷△A1×C標(biāo)準(zhǔn)品）×V反總÷W
= 0.96×（△A2÷△A1）÷W
C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度100μmol/L；V反總：反應(yīng)總體積，0.4ml；W：樣本質(zhì)量，g
注意事項(xiàng):
1、盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品，否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。
2、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高，請(qǐng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
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