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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）檢測試劑盒（100T/48S）
| 貨號 | SH0340 | 售價（元） | 1500 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0340 |
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）檢測試劑盒（ 微量法100T/48S） |
100管/48樣 |
測定意義：
S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶，由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測定原理：
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0340-100T/48S |
Storage |
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試劑一：甲苯 |
5ml（自備） |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
-20℃ |
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試劑三：液體 |
20ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
15ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入10ml蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
測定步驟：
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至400nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表：
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試劑名稱 |
測定管 |
對照管 |
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風(fēng)干土樣（g） |
0.02 |
0.02 |
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試劑一（μl） |
10 |
10 |
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室溫振蕩混勻15min |
90℃振蕩混勻15min |
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試劑二（μl） |
130 |
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蒸餾水 |
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130 |
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試劑三（μl） |
160 |
160 |
混勻， 37℃振蕩反應(yīng)1h后，90℃水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻，
10000g 25℃離心10min，取上清液（在EP管或96孔板中加入下列試劑）；
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上清液（μl） |
70 |
70 |
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試劑四（μl） |
130 |
130 |
充分混勻，室溫靜置2min后， 400nm處測定吸光值A，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設(shè)一個對照管。
S-NAG活力計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.00645x -0.0054；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y為吸光值。
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
S-NAG活力（μmol/d/g 土樣）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反總÷W÷T =55.81×(ΔA+0.0054)
T：反應(yīng)時間，1h=1/24d； V反總：反應(yīng)體系總體積：3×10-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.02g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.0043x -0.0054；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y為吸光值。
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
S-NAG活力（μmol/d/g 土樣）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.0043×V反總÷W÷T =83.72×(ΔA+0.0054)
T：反應(yīng)時間，1h=1/24d； V反總：反應(yīng)體系總體積：3×10-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.02g。mol/mg prot