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土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號 SH0333 售價(元) 1260
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0333

土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

S-AIpH 4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。

測定原理:

S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0333-100T/48S

Storage

試劑一:液體

50ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:液體

10ml

4℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入25ml試劑一充分溶解備用;用不完的試劑4℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。

測定步驟和加樣表:

試劑名稱(μl

測定管

對照管

風(fēng)干土樣(g

0.05

0.05

試劑一

 

400

試劑二

400

 

混勻, 37℃準(zhǔn)確水浴30min后,95℃水浴10min(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后

充分混勻(以保證濃度不變),10000g 25℃離心10min,取上清液;

上清液

200

200

試劑三    

100

100

混勻,95℃水浴10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻, 510nm處,記錄各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸餾水稀釋后測定(計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)),ΔA=A測定-A對照。

S-AI活性計(jì)算

a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.0016x -0.001;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個S-AI活力單位。

S-AI活力(mg/d /g土樣)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V反總÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)

V反總:反應(yīng)體系總體積:0.4ml;T:反應(yīng)時間,1/48d; W:樣本質(zhì)量,0.05g;1mg=1000μg

b.96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.0008x -0.001;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個S-AI活力單位。

S-AI活力(mg/d/g土樣)=[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V反總÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)

V反總:反應(yīng)體系總體積:0.4mlT:反應(yīng)時間,1/48dW:樣本質(zhì)量,0.05g;1mg=1000μg

 

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