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土壤過氧化氫酶檢測試劑盒(微量法100T/48S)

貨號 SH0315 售價(元) 1020
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0315

土壤過氧化氫酶(Solid-Catalase,S-CAT)試劑盒(微量法100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類,在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。

測定原理:

H2O2240nm下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應S-CAT活性的高低。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0315-100T/48S

Storage

試劑一:液體

300μl

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:液體

3ml

4℃

說明書

一份

試劑一:液體300μl×1瓶,4℃保存;臨用前加入29.7ml蒸餾水充分溶解后待用;用不完的試劑4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入1ml蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存(如出現(xiàn)結晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用)。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)和蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至240nm,蒸餾水調零。

2、測定前務必準備96UV板一塊(UV板不是普通酶標板,普通酶標板只能透過可見光,不能透過紫外光,檢測波長小于340nm務必使用UV板)。

3、加樣表。

試劑名稱

測定管

無基質管

風干土樣(g

0.03

0.03

試劑一(μl

260

 

蒸餾水(μl

 

260

25℃振蕩培養(yǎng) 20min

試劑二(μl

10

10

混勻8000g,25℃離心5min,取180uL上清

試劑三(μl

20

20

混勻, 240nm處記錄各管吸光值A。

注意事項

每個測定管要設一個無基質管,無土管只要做一管。

S-CAT活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

單位的定義:每天g風干土樣催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

計算公式:S-CATμmol/d/g)=[(A無土管-A測定管+A無基質管)×V反總÷ε×d×106]÷W÷T=16.5×A無土管-A測定管+A無基質管)

V反總:反應體系總體積,3×10-4 L;ε:過氧化氫摩爾消光系數(shù),4.36×104 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cm; T:反應時間,20 min=1/72d; W:樣本質量,0.03g。

b.96孔板測定的計算公式如下

單位的定義:每天g風干土樣催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

計算公式:S-CATμmol/d/g)=[(A無土管-A測定管+A無基質管)×V反總÷ε×d×106]÷W÷T=33×A無土管-A測定管+A無基質管)

V反總:反應體系總體積,3×10-4 L;ε:過氧化氫摩爾消光系數(shù),4.36×104 L / mol /cm;d96孔板光徑,0.5cmT:反應時間,20 min=1/72d; W:樣品質量,0.03g。

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