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蔗糖合成酶（合成方向；SS-Ⅱ）檢測試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號 | SH0301 | 售價(jià)（元） | 1800 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0301 |
蔗糖合成酶（合成方向；SS-Ⅱ）檢測試劑盒（微量法100T/48S） |
100管/48樣 |
測定意義：
蔗糖是源（葉片等）光合產(chǎn)物向“庫”器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是雙向反應(yīng)酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對于植物蔗糖合成具有重要意義。
測定原理：
SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖，蔗糖與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0301-100T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
2.5ml |
-20℃ |
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試劑二：蔗糖溶液 |
10ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
2ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
25ml |
4℃ |
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試劑五：液體 |
6ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：1000μg/ml蔗糖溶液10ml×1瓶，4℃保存；
試劑五：液體6ml×1瓶，4℃避光保存；
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
樣品測定的準(zhǔn)備：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至480nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測定(在EP管中加入下列試劑）：
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試劑名稱（μl） |
測定管 |
對照管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
空白管 |
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樣本 |
10 |
10 |
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蒸餾水 |
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45 |
45 |
55 |
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試劑二 |
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10 |
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試劑一 |
45 |
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混勻，25℃準(zhǔn)確水浴10min
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試劑三 |
15 |
15 |
15 |
15 |
沸水浴中煮沸10min左右（蓋緊，以防止水分散失），冷卻
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試劑四 |
210 |
210 |
210 |
210 |
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試劑五 |
60 |
60 |
60 |
60 |
混勻，沸水浴30min，冷卻后，取200μl 至微量石英比色皿或96孔板中，480nm下測定各管吸光值。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只要做一管。每個測定管需要設(shè)一個對照管。
SS-Ⅱ活性計(jì)算
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/g鮮重) = C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1000μg/ml；V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01ml； V2：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g；T ：反應(yīng)時間：10min。