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乳酸含量（LA）檢測試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號 | SH0252 | 售價（元） | 1440 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0252 |
乳酸含量（LA）檢測試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測定意義：
乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細胞內(nèi)能量代謝密切相關，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。
測定原理：
乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時使NAD+還原生成NADH和H+，H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原INT生成紅色物質(zhì)，在530nm處有特征吸收峰。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0252-100T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
110ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
2ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
5ml |
4℃ |
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試劑三：粉劑 |
1支 |
-20℃避光 |
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試劑四：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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試劑五：粉劑 |
1支 |
4℃避光 |
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標準品：液體 |
1ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑三：粉劑×1支，-20℃避光保存。臨用前加入0.6ml蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加6ml蒸餾水充分溶解。
顯色液：臨用前根據(jù)用量按照提取液（V）：試劑三（V）：試劑四（V）：試劑五（m）=1（ml)：0.3（ml)：3（ml)：15（mg）的比例充分混勻。（注意：現(xiàn)配現(xiàn)用，用多少配多少，在棕色瓶中配制，試劑盒中帶有4個棕色空瓶）
自備儀器和用品：
天平、研缽、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
樣本處理：
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1ml提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，12000g離心10min，取上清測定。
2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；于4℃，12000g離心10min，取上清測定。
3. 血清：直接測定。
測定操作：
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樣品對照管 |
樣品測定管 |
標準對照管 |
標準測定管 |
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樣品（μl） |
10 |
10 |
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標準品（μl） |
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10 |
10 |
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H2O（μl） |
60 |
90 |
60 |
90 |
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試劑一（μl） |
30 |
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30 |
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試劑二（μl） |
40 |
40 |
40 |
40 |
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顯色液（μl） |
60 |
60 |
60 |
60 |
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充分混勻，于37℃反應30min，于微量石英比色皿/96孔板，測定530nm處吸光值，分別記為A1，A2，A3，A4，△A樣=A2-A1；△A標= A4-A3 |
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注意：標準對照管和標準測定管只需測定一次，每個樣品測定管設一個樣品對照管
計算公式：
1. 按照蛋白含量計算
LA含量（μmol/mg prot）= △A樣÷△A標×C標÷ Cpr
= 2×△A樣÷△A標÷ Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計算
LA含量（μmol/g 鮮重）= △A樣÷△A標×C標÷ W
= 2×△A樣÷△A標÷ W
3. 按照細胞數(shù)量計算
LA含量（μmol/104 cell）= △A樣÷△A標×C標÷ 細胞數(shù)量
= 2×△A樣÷△A標÷ 細胞數(shù)量
4. 按照液體體積計算
LA含量（μmol/ml）= △A樣÷△A標×C標
= 2×△A樣÷△A標
C標：標準品濃度，2mmol/L；W：樣本質(zhì)量，g/ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml
注意事項：
若吸光值超過2，請進行適當?shù)南♂尯笤龠M行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
最低檢出限為1.8μmol/L。