幾丁質酶（Chitinase）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)
| 貨號 | SH0206 | 售價（元） | 816 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0206 |
幾丁質酶（Chitinase）檢測試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義：
幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。
測定原理：
幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與對二甲氨基苯甲醛產生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。
組成：
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產品名稱 |
SH0206-50T/24S |
Storage |
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提取液：液體 |
100 ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
10 ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
10 ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
10 ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
20 ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：液體10 ml×1瓶，4℃保存。（若出現(xiàn)結晶，可80℃左右加熱溶解后使用）
自備儀器和用品：
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿，蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積( ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1 ml提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測。
2. 真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1 ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心20min，取上清置于冰上待測。
3. 培養(yǎng)液：直接測定。
測定操作表：
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對照管 |
測定管 |
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粗酶液（μl） |
400 |
400 |
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提取液（μl） |
600 |
200 |
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試劑一（μl） |
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400 |
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混勻，37℃水浴1h |
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試劑二（μl） |
200 |
200 |
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混勻，沸水浴7min，5000rpm，4℃，離心10min，取上清1000μl。 |
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試劑三（μl） |
200 |
200 |
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試劑四（μl） |
400 |
400 |
計算公式：
標準曲線：y=0.3088-0.003，R2=0.9995
計算公式：
1、 按照樣本重量計算
酶活性定義：37℃條件下，每克組織每小時分解幾丁質產生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。
幾丁質酶活性（mg/h/g鮮重）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×W) ÷T
=8.096×（ΔA +0.003）÷W
2、 按照蛋白質濃度計算
酶活定義：37℃條件下，每毫克蛋白每小時分解幾丁質產生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h mg prot）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T
= 8.096×（ΔA +0.003）÷Cpr
3、 按細胞數(shù)量計算
酶活定義：37℃條件下，每104個細胞每小時分解幾丁質產生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h /104 cell）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)
=8.096×（ΔA +0.003）÷細胞數(shù)量
4、按液體體積計算
酶活定義：37℃條件下，每毫升培養(yǎng)液每小時分解幾丁質產生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h / ml）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷V樣=8.096×（ΔA +0.003）
V反總：反應體系總體積，1 ml；V樣：反應體系中樣本體積，0.4 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ ml
注意事項：
1、 反應結束后立即進行比色。
2、 試劑四有一定的毒性，請操作時做好防護措施。