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總多糖檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號(hào) SH0204 售價(jià)(元) 504
規(guī)格 50T/48S CAS號(hào)
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0204

總多糖檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

多糖是生物體中廣泛存在的物質(zhì),是一類由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接而成的天然高分子多聚物,它是生物體內(nèi)重要的生物大分子,是維持生命活動(dòng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)的基本物質(zhì)之一。

測(cè)定原理:

利用水提醇沉法提取總多糖,苯酚-硫酸法測(cè)定總多糖含量。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0204-50T/48S

Storage

試劑一:液體

12ml

4℃

試劑二:無水乙醇,自備

--

--

試劑三:濃硫酸,自備

--

--

說明書

一份

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、無水乙醇、濃硫酸、蒸餾水、水浴鍋。

總多糖提取: 

樣本烘干粉碎,稱取約0.05g樣本,加入1ml水,充分勻漿。100℃水浴提取2h(必須蓋緊蓋子防止水分流失),冷卻后10000g離心10min,取上清。吸取0.2ml上清,慢慢加入0.8ml無水乙醇,混勻后4℃靜置過夜,10000g離心10min,棄上清,沉淀中加入1ml水,充分混勻溶解沉淀。

測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至490nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 吸取400μl上清,加入200μl試劑一和1ml濃硫酸,混勻后90℃水浴20min,流水冷卻。取1ml加入比色皿,于490nm下測(cè)定吸光值A。

 

總多糖含量計(jì)算:

以葡萄糖作為對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 15.962x - 0.0037,R2 = 0.9973x為葡萄糖含量(mg/ml),y為吸光值。

總多糖含量(μg/g干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000

=313.24×(A+0.0037) ÷W

V1:醇沉后重新溶解后的體積,1ml;V2:進(jìn)行醇沉的體積,0.2ml;V3,提取時(shí)加入水的體積,1ml;W:樣本質(zhì)量,g;1000mgμg的換算系數(shù)。

 

 

 

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